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三七總皂苷含量的紫外分光光度法測定
更新時間:2018-10-18 點擊次數:4784

七皂苷的含量可作為三七及其制劑的質控指標。筆者 利用紫外分光光度法對三七中總皂苷的含量進行了測定, 結 果如下。 1 儀器藥品與試劑UV1901PC紫外可見分光光度計 三七藥材 三七總皂苷對照品濃硫酸、甲醇均為分析純。 2 方法與結果 2.1 樣品供試液的制備 稱取干燥的三七藥材粉末 1.0g, 以 75%乙醇室溫提取 3 次,10ml/次, 提取 45min, 合并提取 液, 水浴減壓蒸干, 殘渣以少許蒸餾水溶解, 加至已處理好的 大孔吸附樹脂柱(西安藍深公司,LSA 型,1.5cm× 10cm)上, 以 蒸餾水洗 20ml, 水液棄去, 繼以 60%乙醇洗脫約 30ml, 并以 乙醇稀釋至 50.0ml, 搖勻, 取少許以 0.45μm 微孔濾膜濾過, 即得。 2.2 標準曲線的制備 精密稱取三七總皂苷對照品 10.2mg, 加甲醇稀釋至 100ml, 制成對照品溶液。精密量取 0.0、 1.0、 2.0、 3.0、 4.0、 5.0ml 分別置于 10ml 容量瓶中, 揮干溶劑, 加入 濃硫酸 1ml, 于 80℃恒溫水浴中加熱反應 1h, 立即置于冰水 中冷卻 5min, 分別加無水乙醇稀釋至 10ml 刻度, 搖勻, 放置 30min, 以試劑空白作對照, 照分光光度法[3], 在 277nm 波長 處測定吸光度(A)。以吸光度為縱坐標, 濃度為橫坐標, 繪制 標準曲線; 各濃度(C)相應的吸光度(A)經統計處理, 求得回 歸方程為:A=0.06531+0.03304C,r=0.9996。 2.3 穩定性試驗 精密吸取供試品溶液 1.0ml, 按照標準曲 線制備項下操作, 放置 0、 1、 2、 3、 4、 5、 6h 后測定, 結果其 RSD 為 2.16%, 表明供試品溶液在 6h 內穩定。

2.4 精密度試驗 精密吸取三七總皂苷對照品溶液 2.0ml, 按標準曲線制備項下操作, 測定吸光度, 重復 5 次,RSD為 0.83%, 精密度良好。 2.5 重現性試驗 平行取同一供試品 5 份, 分別按樣品測 試條件測定, 結果 RSD為 1.78%, 重現性符合要求。 2.6 回收率試驗 取已知含量的樣品 5 份, 精密稱定, 分別 加入一定量的三七總皂苷對照品, 按照標準曲線制備項下操 作, 分別測定, 結果平均回收率為 100.72%,RSD為 2.05%。 2.7 供試品中三七總皂苷含量測定 精密量取供試品溶液 40μ l 置 10ml 具塞試管中, 于水浴中揮干溶劑, 照標準曲線 制備項下方法自“加入濃硫酸 1ml”起, 依法測定吸光度, 并 代入回歸方程計算其含量。按本法分別測定了 6 種不同產地 來源的三七藥材中總皂苷的含量, 其結果見表 1。

3 討 論 本文所用三七總皂苷含量檢測的方法, 其原理主要是人 參皂苷分子上的糖基能被濃硫酸氧化脫水形成糠醛衍生物。 該法不僅速度快, 操作方便、結果準確, 靈敏度高, 而且重現 性好, 可為三七藥材及其制劑的質控提供一定的參考依據。 

 

 

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